Problem to be solved: to provide a double specific antibody containing a variable heavy chain domain (VH) and a variable light chain domain (VL) or its method of producing an antigen binding fragment.The method is a step of providing an antibody containing VH and VL.Both VH and VL combined.An antigen binding site that binds to a first epitope but does not bind to a second epitopeAndThe antibody comprises at least one of an electrostatic or hydrophobic amino acid at a specific location of VL(b) the step of modifying the nucleic acid sequence encoding the VH of the antibody in step (a)；The process of modifying one or more solvent accessible amino acid residues(c) the process of expressing VH modified in VL and stepA double specific antibody containing VH modified in (d) VL and step (c) or an antigen binding fragment thereof；Both VH and VL combined.Forming an antigen binding site that specifically binds to the first epitope and the second epitope.No selection【課題】可変重鎖ドメイン（ＶＨ）及び可変軽鎖ドメイン（ＶＬ）を含む二重特異性抗体又はその抗原結合性断片を作製する方法の提供。【解決手段】該方法は（ａ）ＶＨ及びＶＬを含む抗体を提供する工程であり、ＶＨ及びＶＬは共に対合して、第１のエピトープに結合するが第２のエピトープに結合しない抗原結合部位を形成し、かつ、前記抗体はＶＬの特定の位置において静電的又は疎水性アミノ酸を少なくとも一つ含む工程、（ｂ）工程（ａ）の抗体の前記ＶＨをコードする核酸配列を改変する工程であり、１個以上の溶媒接近可能なアミノ酸残基が改変される工程、（ｃ）ＶＬ及び工程（ｂ）で改変されたＶＨを発現させる工程、（ｄ）ＶＬ及び工程（ｃ）で改変されたＶＨを含む二重特異性抗体又はその抗原結合性断片を選択する工程であって、ＶＨ及びＶＬは共に対合して、第１のエピトープ及び第２のエピトープに特異的に結合する抗原結合部位を形成する工程、を含む。【選択図】なし
