The present invention addresses the problem of producing a functional intestinal organoid from pluripotent stem cells. An intestinal organoid is produced from pluripotent stem cells through the following steps: (1) a step for differentiating the pluripotent stem cells into endoderm-like cells； (2) a step for differentiating the endoderm-like cells obtained in step (1) into intestinal stem cell-like cells； (3) a step for culturing the intestinal stem cell-like cells obtained in step (2) to form a spheroid； and (4) a step for differentiating the spheroid formed in step (3) to form an intestinal organoid, wherein culturing is carried out in the presence of, in addition to an epidermal growth factor, a BMP inhibitor and a Wnt signal activator, a MEK1/2 inhibitor, a DNA methylation inhibitor, a TGFβ receptor inhibitor and a γ-secretase inhibitor.La présente invention aborde le problème de la production d'un organoïde intestinal fonctionnel à partir de cellules souches pluripotentes. Un organoïde intestinal est produit à partir de cellules souches pluripotentes par les étapes suivantes : (1) une étape de différenciation des cellules souches pluripotentes en cellules de type endoderme ； (2) une étape de différenciation des cellules de type endoderme obtenues à l'étape (1) en cellules de type cellules souches intestinales ； (3) une étape de culture des cellules de type cellules souches intestinales obtenues à l'étape (2) pour former un sphéroïde ； et (4) une étape de différenciation du sphéroïde formé à l'étape (3) pour former un organoïde intestinal, la culture étant réalisée en présence, en plus d'un facteur de croissance épidermique, d'un inhibiteur de BMP et d'un activateur de signal Wnt, d'un inhibiteur de MEK1/2, d'un inhibiteur de méthylation d'ADN, d'un inhibiteur de récepteur de TGFβ et d'un inhibiteur de γ-sécrétase.多能性幹細胞から機能的な腸管オルガノイドを作製することを課題とする。（１）多能性幹細胞を内胚葉様細胞へと分化させる工程、（２）工程（１）で得られた内胚葉様細胞を腸管幹細胞様細胞へと分化させる工程、（３）工程（２）で得られた腸管幹細胞様細胞を培養し、スフェロイドを形成させる工程、及び（４）工程（３）で
