The purpose of the present invention is to provide immortalized stem cells for producing culture supernatant that can be used in the treatment of human diseases. Provided is a method for producing immortalized stem cells, the method being provided with: a step for producing a DNA fragment that includes a telomerase reverse transcriptase and at least one gene selected from the group consisting of Bmi-1, human papilloma virus E6, and human papilloma virus E7； a step for producing a viral vector that incorporates the DNA fragment including the gene； a step for transfecting the viral vector into mammalian stem cells and introducing the gene into the stem cells； and a step for culturing the stem cells into which the gene was introduced and using a drug to select immortalized stem cells.La présente invention vise à fournir des cellules souches immortalisées permettant de produire un surnageant de culture qui peut être utilisé dans le traitement de maladies humaines. L'invention concerne un procédé de production de cellules souches immortalisées, le procédé comportant : une étape de production d'un fragment d'ADN qui comprend une transcriptase inverse de la télomérase et au moins un gène choisi dans le groupe constitué de Bmi-1, E6 du papillomavirus humain et E7 du papillomavirus humain ； une étape de production d'un vecteur viral qui incorpore le fragment d'ADN comprenant le gène ； une étape de transfection du vecteur viral dans des cellules souches mammifères et d'introduction du gène dans les cellules souches ； et une étape de culture des cellules souches dans lesquelles le gène a été introduit et d'utilisation d'un médicament pour sélectionner des cellules souches immortalisées.ヒトの疾病の治療に使用可能な培養上清を産生する不死化幹細胞を提供することを目的とする。Ｂｍｉ－１、ヒトパピローマウイルスＥ６及びヒトパピローマウイルスＥ７からなる群から選ばれる少なくとも１以上の遺伝子と、テロメラーゼ逆転写酵素とを含む、ＤＮＡ断片を作製する工程と；前記遺伝子を含むＤＮＡ断片を組み込んだウイルスベクターを作製する工程と；前記ウイルスベクターを哺乳類の幹細胞にトランスフェクトさせて前記遺伝子を前記幹細胞に導入する工程と；前記遺伝子が導入された前記幹細胞を培養し、薬剤によって不死化幹細胞を選択する工程と；を備える不死化幹細胞の作製方法を提供する。
