A method for the production of human glycosylated Interferon-beta (IFN-β) is described, comprising two affinity chromatography steps followed by hydrophobic interaction chromatography step preferably with a subsequent anion exchange chromatography step. IFN-β obtained by the method as described is characterized by a high purity and specific biologically activity, because of which it is particularly suitable for the production of pharmaceutical compositions.Linvention porte sur un procédé de production dinterféron-bêta (IFN-β) glycosylé humain, comprenant deux étapes de chromatographie daffinité suivies par une étape de chromatographie par interaction hydrophobe, de préférence avec une étape subséquente de chromatographie déchange danions. LIFN-β obtenu par le procédé tel que décrit est caractérisé par une pureté élevée et par une activité biologique spécifique élevée, en raison du fait quil est particulièrement approprié pour la production de compositions pharmaceutiques.