In the present invention, a fluorescent image acquisition method includes the following steps (A) through (D): (A) a step in which a sample is irradiated with the excitation light of luminous flux that spreads from a position at a distance from the sample to excite a fluorescent material in the sample and thereby generate fluorescence, and the generated fluorescence is detected by a 2D detector to obtain a fluorescent image (B) at least one step in which at the point in time when the 2D detector attempts to detect fluorescence, in a state where fluorescence from a portion emitting the strongest fluorescence is effectively blocked from entering the 2D detector, a fluorescent image is obtained via the 2D detector by irradiating the sample with excitation light, similar to step (A) (C) a step in which at least two fluorescent images constituted by the fluorescent image obtained in step (A) and the at least one fluorescent image obtained in step (B) are integrated into one image and (D) a step in which the image which was integrated in step (C) is displayed.La présente invention concerne un procédé dacquisition dimage fluorescente comprenant les étapes (A) à (D) suivantes : (A) une étape dirradiation dun échantillon au moyen dune lumière dexcitation provenant dun flux lumineux qui sétend à partir dune position située à lécart de léchantillon de manière à exciter un matériau fluorescent présent dans léchantillon et ainsi générer une fluorescence qui est ensuite détectée par un détecteur 2D afin dobtenir une image fluorescente (B) une ou plusieurs étapes lors desquelles, lorsque le détecteur 2D tente de détecter la fluorescence, dans un état où la fluorescence dune partie émettant la fluorescence la plus forte est bloquée et ne peut pas pénétrer dans le détecteur 2D, une image fluorescente est obtenue par lintermédiaire du détecteur 2D en irradiant léchantillon au moyen dune lumière dexcitation, comme dans létape (A) (C) une étape lors de laquelle deux images fluorescen
