ZAMFIRESCU STELA FILOFTEIA,ZAMFIRESCU STELA FILOFTEIA,DOBRIN NICOLAE,DOBRIN NICOLAE
申请号：
RO201101325
公开号：
RO127850B1
申请日:
2011.12.06
申请国别(地区):
RO
年份:
2016
代理人:
摘要：
The invention relates to a method for diagnosing a ram semen material in order to use the same in assisted reproduction techniques. According to the invention, the method consists in collecting solitary ram sperm cells which are diluted in a ratio of 1:1 with a Tris buffer and centrifuged, followed by the removal of the supernatant, the resuspension of the precipitate in a prefixing medium, then the suspension is centrifuged and settled and the precipitate is again prefixed and washed in the same conditions, being portioned in specimens with the side of 0.5 mm which are separately fixed with 2% osmic acid for 4 h at 4°C, the specimens are washed with a buffer and are then dehydrated in baths with ethyl alcohol of increased concentration, for 10 min, during the second washing with alcohol there takes place the contrasting with 0.5 % uranyl acetate and 1% phosphotungstic acid, followed by two baths with propylene oxide, finally there is carried out the impregnation stage and the embedding of specimens in epoxy resins, the thus prepared material being subjected to the analysis by electron microscopy.Invenţia se referă la o metodă de diagnosticare a unui material seminal de berbec, în vederea utilizării acestora în tehnici de reproducere asistată. Metoda conform invenţiei constă din colectarea de celule spermatice solitare de berbec, care se diluează în proporţie de 1:1 cu tampon Tris şi centrifugate, urmată de îndepărtarea supernatantului, resuspendarea sedimentului într-un mediu de prefixare, după care suspensia se centrifughează şi se decantează, iar sedimentul este din nou prefixat şi spălat în aceleaşi condiţii, urmând să fie porţionat în specimene cu latura de 0,5 mm, care se fixează separat cu acid osmic 2%, timp de 1 h, la 4°C, specimenele se spală cu tampon şi sunt apoi deshidratate în băi de 10 min, cu alcool etilic de concentraţii crescătoare, la a 2-a spălare cu alcool făcându-se contrastarea în acetat de uranil 0,5% şi acid fosfotungstic 1%, urmată de d
