JASKULA-RANGA, Vinod,ZACK, Donald,WELSBIE, Derek, S.
申请号：
USUS2017/040707
公开号：
WO2018/009534A1
申请日:
2017.07.05
申请国别(地区):
US
年份:
2018
代理人:
摘要：
The presently disclosed subject matter provides compositions and methods comprising improvements of a CRISPR system (e.g. CRISPR associated (Cas) 9 (CRISPR-Cas9, non-Cas9 CRISPR systems). Such compositions may comprise modifications to the H1 promoter region, addition of 5'UTR modifications, different orthologous sequences of the H1 promoter, novel compact bidirectional promoter sequences with both pol II and pol III activity, addition of Kozak consensus sequences, termination sequences, addition of conditional pol II/pol III bidirectional promoter expression, addition of a donor template sequence for correcting mutations, or combinations thereof. Other aspects of the invention relate to modifications to Cas9 through post-transcriptional cell-cycle regulation fusions, engineered partial target sites such that the nuclease can bind without DNA cleavage, auto-regulation sites, and N-terminal modifications to modulate half-life.La présente invention concerne des compositions et des procédés comprenant des améliorations d'un système CRISPR (<；i />；par exemple CRISPR associé à (Cas) 9 (des systèmes CRISPR-Cas9, non-Cas9 CRISPR). De telles compositions peuvent comprendre des modifications apportées à la région du promoteur H1, l'addition de modifications apportées à la région 5'UTR, différentes séquences orthologues du promoteur H1, de nouvelles séquences de promoteurs bidirectionnels compacts présentant à la fois l'activité de pol II et de pol III, l'addition de séquences consensus de Kozak, des séquences de terminaison, l'addition de l'expression conditionnelle de promoteurs bidirectionnels de pol II/pol III, l'addition d'une séquence de matrice donneuse permettant de corriger des mutations, ou des combinaisons de celles-ci. D'autres aspects de l'invention concernent des modifications apportées à Cas9 par l'intermédiaire de fusions de régulation post-transcriptionnelle du cycle cellulaire, des sites cibles partiels modifiés de telle sorte que la nucléase peut se lie
