The present invention relates to compositions and methods, including the improvement of the CRISPR system (for example, CRISPR-associated (Cas) 9 (CRISPR-Cas9 system, not Cas9 CRISPR)). Such compositions may contain modifications of the H1 promoter region, addition of 5'UTR modifications, various orthologous sequences of the H1 promoter, new compact bi-directional promoter sequences with activity against both pol II and pol III, insertion of Kozak consensus sequences, termination sequences, insertion of a bidirectional promoter pol II / pol III with conditionally dependent expression, insertion of a donor matrix sequence for the correction of mutations or a combination thereof. Other aspects of the invention relate to Cas9 modifications via fusion constructs for post-translational regulation of the cell cycle, constructed partial target regions so that the nuclease can bind without cleavage, auto-regulation regions and N-terminal modifications to modulate half-life.Настоящее изобретение относится к композициям и способам, включающим усовершенствование системы CRISPR (например, CRISPR-ассоциированная (Cas) 9 (системы CRISPR-Cas9, не Cas9 CRISPR)). Такие композиции могут содержать модификации промоторной области H1, добавление модификаций 5'UTR, различные ортологичные последовательности промотора H1, новые компактные последовательности двунаправленного промотора с активностью в отношении как pol II, так и pol III, вставку консенсусных последовательностей Козак, последовательностей терминации, вставку двунаправленного промотора pol II/pol III с зависимой от условий экспрессией, вставку донорной матричной последовательности для коррекции мутаций или их комбинации. Другие аспекты изобретения относятся к модификациям Cas9 посредством слитых конструкций для посттрансляционной регуляции клеточного цикла, сконструированных частичных участков-мишеней, чтобы нуклеаза могла связываться без расщепления, участков ауторегуляции и N-концевых модификаций для модулирования времени по
