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METHODS AND COMPOSITIONS FOR USING ZINC FINGER ENDONUCLEASES TO ENHANCE HOMOLOGOUS RECOMBINATION
专利权人:
发明人:
申请号:
EP03714379.9
公开号:
EP1504092B2
申请日:
2003.03.20
申请国别(地区):
EP
年份:
2014
代理人:
摘要:
Embodiments relate to methods of generating a genetically modified cell. The methods can include providing a primary cell containing an endogenous chromosomal target DNA sequence in which it is desired to have homologous recombination occur. The methods also can include providing a zinc finger endonuclease (ZFE) that includes an endonuclease domain that cuts DNA, and a zinc finger domain that includes a plurality of zinc fingers that bind to a specific nucleotide sequence within the endogenous chromosomal target DNA in the primary cell. Further, the methods can include contacting the endogenous chromosomal target DNA sequence with the zinc finger endonuclease in the primary cell such that the zinc finger endonuclease cuts both strands of a nucleotide sequence within the endogenous chromosomal target DNA sequence in the primary cell, thereby enhancing the frequency of homologous recombination in the endogenous chromosomal target DNA sequence. The methods also include providing a nucleic acid comprising a sequence homologous to at least a portion of said endogenous chromosomal target DNA such that homologous recombination occurs between the endogenous chromosomal target DNA sequence and the nucleic acid.La présente invention concerne des formes de réalisation de procédés de production dune cellule génétiquement modifiée. Les procédés peuvent consister à utiliser une cellule primaire contenant une séquence dADN cible chromosomique endogène dans laquelle on souhaite voir se produire une recombinaison homologue. Les procédés peuvent également consister à utiliser une endonucléase à doigts de zinc (ZFE) qui comprend un domaine endonucléase qui coupe lADN et un domaine à doigts de zinc qui comprend une pluralité de doigts de zinc qui se lient à une séquence nucléotidique spécifique dans lADN cible chromosomique endogène de la cellule primaire. De plus, les procédés peuvent consister à mettre en contact la séquence dADN cible chromosomique endogène avec lendonucléase à doig
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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