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基于D‑丙氨酸缺陷型筛选标记的表达D‑阿洛酮糖 3‑差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌的构建方法
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 江波,沐万孟,何伟伟,张涛
- 申请号：
- CN201510294626.2
- 公开号：
- CN104894047B
- 申请日:
- 2015.06.02
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 时旭丹`张仕婷
- 摘要：
- 基于D‑丙氨酸缺陷型筛选标记的表达D‑阿洛酮糖 3‑差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌的构建方法，属于酶基因工程技术领域。以枯草芽孢杆菌1A751为出发菌株，敲除其染色体上D‑丙氨酸消旋酶基因(dal)得到D‑丙氨酸缺陷型的1A751(dal‑)；将梭状芽胞杆菌ATCC 35704的DPE酶基因作亲本，在其上游融合P43启动子构建成P43‑DPE，将其构建至质粒pUB110(NCBI‑Gene ID:9507338)中得到pUB‑P43‑DPE，将pUB‑P43‑DPE上的抗生素抗性基因Kan和Blm用dal替代，构建成pUB‑P43‑DPE‑dal；再转化进1A751(dal‑)中，得重组枯草芽孢杆菌1A751‑pUB‑P43‑DPE‑dal，命名为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）SK38.001，保藏编号CCTCC NO:M 2015257。其发酵液总酶活达16U/mL，具有重要的工业应用价值。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
