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D-丙氨酸缺陷型筛选表达纤维二糖-2-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 沐万孟,江波,陈秋铭,张涛
- 申请号：
- CN201510779911.3
- 公开号：
- CN105368767A
- 申请日:
- 2015.11.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 时旭丹`张仕婷
- 摘要：
- 基于D-丙氨酸缺陷型筛选标记的表达纤维二糖-2-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用，属于酶的基因工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌1A751为出发菌株，敲除其染色体上D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到D-丙氨酸缺陷型的枯草芽孢杆菌1A751(dal-)；将来源于一种嗜热厌氧杆菌的纤维二糖-2-差向异构酶（CE酶）基因作亲本，在其上游融合P43启动子构建成P43-TsCE，将P43-TsCE构建至质粒pUB110中得pUB-P43-TsCE，将质粒pUB-P43-TsCE上的抗生素抗性基因卡那霉素和博来霉素用(dal)替代，构建成pUB-P43-TsCE-dal；将pUB-P43-TsCE-dal转化进宿主1A751(dal-)中，得一株表达纤维二糖-2-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌，其保藏编号CCTCC NO：M 2015582。发酵液总酶活达7U/mL，具有重要的工业应用价值。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
