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一种表达谷氨酸脱羧酶的无抗生素抗性重组枯草芽孢杆菌的构建及发酵方法
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 江波,沐万孟,丁汪洋,张涛
- 申请号:
- CN201710193236.5
- 公开号:
- CN106967659A
- 申请日:
- 2017.03.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 时旭丹`张仕婷
- 摘要:
- 一种表达谷氨酸脱羧酶的无抗生素抗性重组枯草芽孢杆菌的构建及发酵方法,属于生物工程技术领域。以枯草芽孢杆菌WB600为出发菌株,敲除其染色体上D‑丙氨酸消旋酶基因(dal)得到D‑丙氨酸缺陷型WB600(dal‑);采用重叠延伸PCR技术将优化后的gad基因与无抗生素抗性表达载体pUB110(其抗生素抗性基因被D‑丙氨酸消旋酶基因所代替)融合得到多聚物,再将多聚物转化进枯草芽孢杆菌WB600(dal‑)的感受态中,多聚物在宿主中重组,得到重组质粒pUB‑HpaII‑P43‑gad‑dal,命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SK44.001,保藏编号CCTCC NO:M 2016774。其发酵液酶活可达8.6U/mL,具有重要的工业应用价值。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/