一种乳酸菌口服液的制备方法,属于保健食品领域。将食用红糖、食用葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾、氯化钠按照比例混合,加水溶解,热处理灭菌;然后接入干酪乳杆菌干酪亚种Lactobacillus casei subsp.Casei,植物乳杆菌Lactobacillusplantarum,嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus,凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans之一或组合,37℃培养48小时,pH值降至3.6左右时收获,无菌分装。本发明方法制备的乳酸菌口服液为棕色液体,味酸,活菌含量达10亿/mL。特别适用于改善消化不良、吸收不良、胃口不佳、腹泻、便秘、肠胀气等胃肠问题。