Decellularized tissue-derived extracellular matrices (ECM) and methods of generating and using same are provided. The method of generating a decellularized matrix includes the steps of: (a) subjecting the tissue to washes and a hypertonic buffer (b) subjecting the tissue to an enzymatic proteolytic digestion with an enzyme such as trypsin and (c) removing all cellular components from the tissue using a detergent solution which includes Triton-X-100 and ammonium hydroxide. Specifically, there is provided a decellularized myocardium-derived matrix which is completely devoid of all cellular components and hence non-immunogenic in a subject, exhibits suitable structural and mechanical properties for cardiac tissue engineering or replacement therapy of damaged cardiac tissue, and is capable of remodeling upon seeding of cells.Linvention concerne une matrice extracellulaire décellularisée dérivée dun tissu (ECM) et des procédés permettant de générer et dutiliser cette matrice. Le procédé permettant de générer une matrice décellularisée consiste : (a) à soumettre le tissu à plusieurs lavages et à un tampon hypertonique (b) à soumettre le tissu à une digestion protéolytique enzymatique avec un enzyme telle que la trypsine et (c) à enlever tous les composants cellulaires du tissu au moyen dune solution détergente qui contient du Triton-X-100 et de lhydroxyde dammonium. Dune manière plus spécifique, linvention concerne une matrice décellularisée dérivée du myocarde qui est complètement exempte de tout composant cellulaire et, par conséquent, non immunogène chez un sujet, qui présente des propriétés structurelles et mécaniques appropriées pour une modification génétique du tissu cardiaque ou une thérapie de remplacement du tissu cardiaque ayant subi une lésion et qui peut subir un remodelage après un ensemencement de cellules.