Provided is a method capable of separating a target cyclic macrolide compound without using a silver compound even when a compound having a double bond similar to the target cyclic macrolide compound is mixed. A method for separating a cyclic macrolide compound from a mixture comprising the cyclic macrolide compound and at least one analogous compound thereof, wherein the mixture is subjected to silica gel column chromatography using an asymmetry identifying agent-immobilized silica gel.은 화합물을 사용하지 않고, 목적으로 하는 고리형 매크로라이드계 화합물과 동일하게 이중 결합을 갖는 화합물이 혼재하고 있어도 분리할 수 있는 방법의 제공. 고리형 매크로라이드계 화합물 및 1 종 이상의 그 유연 화합물을 함유하는 혼합물을 부제 식별제 고정화 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 처리하는 것을 특징으로 하는 그 혼합물로부터 고리형 매크로라이드계 화합물의 분리 방법.
