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表达量提高的突变葡萄糖氧化酶及其编码基因和应用
- 专利权人:
- 广东溢多利生物科技股份有限公司
- 发明人:
- 聂金梅,李阳源,周银华,陈丽芝,刘金山,李天碧
- 申请号:
- CN201510226869.2
- 公开号:
- CN105002147A
- 申请日:
- 2015.05.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 高宇
- 摘要:
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及表达量提高的突变葡萄糖氧化酶及其编码基因和应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明采用定点突变技术将黑曲霉Aspergillus niger GIM 3.452(CICC 2377)的葡萄糖氧化酶(GOD)基因(Genebank:FJ979866.1)进行定点突变,使其氨基酸序列突变位点为Y76C和Q279K;将突变基因克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA,转化Pichia pastoris X33,筛选得到表达量提高的葡萄糖氧化酶毕赤酵母菌株P.pastoris X33-pPICZαA-GODmut;酶学性质测定表明,突变的葡萄糖氧化酶基因能在毕赤酵母中稳定、高效的表达及遗传,突变菌株所表达的葡萄糖氧化酶的酶活性以及稳定性显著高于出发菌株。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/