本发明公开了葡萄糖氧化酶突变基因及其表达和应用。本发明将葡萄糖氧化酶基因通过密码子优化、GC含量改变等方式，改变了272个碱基，将GC含量由55.54％降为48.44％，得到葡萄糖氧化酶突变基因，其碱基为SEQ ID NO.2所示。本发明将葡萄糖氧化酶突变基因转入到毕赤酵母中进行表达，试验结果表明，相比于突变前，葡萄糖氧化酶突变基因在毕赤酵母中的分泌表达量有显著提高，与国内外部分研究比较，本发明葡萄糖氧化酶突变基因的最终表达量达到较高的表达水平，为进一步工业化扩大生产奠定了基础。葡萄糖氧化酶酶学性质测定表明，采用本发明葡萄糖氧化酶突变基因所表达的重组葡萄糖氧化酶蛋白具有良好的热稳定性和较高酶活力。
