一种人工改造的葡萄糖氧化酶基因及其表达应用

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专利权人:

北京化工大学

发明人:

谭天伟,张琛

申请号：

CN201410462639.1

公开号：

CN104263744B

申请日:

2014.09.11

申请国别(地区):

中国

年份:

2017

代理人:

刘萍

摘要：

一种人工改造的葡萄糖氧化酶基因及其表达应用，属于蛋白或酶制剂改造工程以及葡萄糖氧化酶生产领域。所要解决的问题是在现有葡萄糖氧化酶的基础上进一步提高其酶的活性。本发明通过蛋白或酶制剂改造工程中的非理性手段DNA shuffling技术改造来自于黑曲霉Z‑25的葡萄糖氧化酶基因，挑选DNaseI随机切割后的基因片段利用DNA shuffling技术将片段重组成为完整变异基因，与穿梭表达质粒连接之后整合入酵母的基因组中。从突变库中筛选得到酶活显著提高的菌株，其变异序列如SEQ ID NO.2所示。在酵母的3L放大试验当中葡萄糖氧化酶的最终酶活达到了较高的水平。最后在酶活与基因层面，验证得到的高酶活表达菌株有着良好的遗传性。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/