The purpose of the present invention is to provide a method for inducing the differentiation of insulin-producing cells efficiently in a xeno-free culture system. Provided are (1) a step for culturing stem cells in a medium including an activator of activin receptor-like kinase-4,7 and GSK inhibitor, then in a medium containing an activator of activin receptor-like kinase-4,7； (2) a step for culturing the cells obtained in step (1) in a medium containing hedgehog signaling inhibitor and FGF； (3) a step for culturing the cells obtained in step (2) in a medium containing a retinoic acid receptor agonist, hedgehog signaling inhibitor, and BMP signaling inhibitor； (4) a step for culturing the cells obtained in step (3) in a medium containing TGF-βI-type activin receptor-like kinase-4,5,7 inhibitor and BMP signaling inhibitor； and (5) a step for culturing the cells obtained in step (4) in a medium containing a phosphodiesterase inhibitor.L'objet de cette invention est de pourvoir à un procédé pour induire de manière efficace la différenciation des cellules productrices d'insuline dans un système de culture sans xéno. L'invention concerne (1) une étape de culture de cellules souches dans un milieu contenant un activateur de kinase-4,7 de type récepteur d'activine et un inhibiteur de GSK, puis dans un milieu contenant un activateur de kinase-4,7 de type récepteur d'activine ； (2) une étape de culture des cellules obtenues à l'étape (1) dans un milieu contenant un inhibiteur de la signalisation hedgehog et un FGF ； (3) une étape de culture des cellules obtenues à l'étape (2) dans un milieu contenant un agoniste du récepteur d'acide rétinoïque, un inhibiteur de la signalisation hedgehog, et un inhibiteur de la signalisation BMP ； (4) une étape de culture des cellules obtenues à l'étape (3) dans un milieu contenant un inhibiteur de kinase-4,5,7 de type récepteur d'activine de la classe des TGF-β1 et un inhibiteur de la signalisation BMP ； et (5) une étape de culture des cellu
