PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for manufacturing a cell structure into which nucleic acid is introduced at high nucleic acid introducing efficiency in a simple manner.SOLUTION: A method for manufacturing a cell structure into which nucleic acid is introduced includes: a preparation step of preparing a low cloud point-type temperature-responsive polymer composition containing 2-(N,N-dimethylaminoethyl) methacrylate and/or a polymer of a derivative thereof, and nucleic acid an arranging step of covering a culture surface of a cell culture vessel by the low cloud point-type temperature-responsive polymer composition to arrange a covered cell culture vessel a first seeding step of seeding cells on a culture surface of the covered cell culture vessel at a cell density of 100 pieces./mm2 or more a first culture step of culturing the cells seeded on the first seeding step until they reach a cell density of 200 pieces./mm2 or more a second seeding step of seeding on the seeded cells of the covered cell culture vessel at a cell density of 3000 pieces./mm2 or more and a second culture step of culturing the cells seeded in the second seeding step.SELECTED DRAWING: Figure 2COPYRIGHT: (C)2016,JPO&INPIT【課題】本発明は、高い核酸導入効率で、簡便に、核酸が導入された細胞構造体の製造方法を提供することを目的とする。【解決手段】2-(N,N-ジメチルアミノエチル)メタクリレート及び/又はその誘導体の重合体と核酸とを含む低曇点型温度応答性ポリマー組成物を調製する調製工程と、低曇点型温度応答性ポリマー組成物で細胞培養器の培養面を被覆して、被覆細胞培養器を準備する準備工程と、細胞を、100個/mm2以上の細胞密度で、被覆細胞培養器の培養面上に播種する第1播種工程と、第1播種工程において播種した細胞を、200個/mm2以上の細胞密度になるまで、培養する第1培養工程と、細胞を、3000個/mm2以上の細胞密度で、被覆細胞培養器の播種した細胞上に播種する第2播種工程と、第2播種工程において播種した細胞を培養する第2培養工程と、を含むことを特徴とする、核酸が導入された細胞構造体の製造方法。【選択図】図2
