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具有抗抑制活性的重组木聚糖酶XynB的构建方法
- 专利权人:
- 梁方方
- 发明人:
- 莫毅,梁方方,蒋和生,叶健,郭亚芬
- 申请号：
- CN201711034272.3
- 公开号：
- CN107586787A
- 申请日:
- 2017.10.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 王洪娟`马赟斋
- 摘要：
- 本发明公开了具有抗抑制活性的重组木聚糖酶XynB的构建方法，提取小麦全基因组，并采用以下特异引物扩增小麦的Xyn B基因第三外显子内的活性位点序列，电泳切胶回收DNA片段经限制性内切酶EcoR V和EcoR I酶切后与载体pET30a+构建重组表达载体，经转化菌转化后获得重组质粒pET30a‑Xyn B，重组质粒pET30a‑Xyn B转化至工程菌，经培养后获取单克隆菌落，转至培养基中培养并诱导蛋白表达，获得重组木聚糖酶XynB；其中，所述的特异引物为：正向引物：5’‑TCGATATCATGCAGCTGGACAACGCCTT‑3’，反向引物：5’‑TCGAATTCTGCGTCCGTCTTCCACTCCC‑3’。所得重组木聚糖酶XynB活性强，取其未经过纯化的酶液进行DNS检测，以桦木木聚糖为底物推算，重组木聚糖酶Xyn B的比活力能达到67.30U/mg。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
