The present invention relates to a particle separating and aligning apparatus for separating and aligning two or more kinds of particles mixed in a fluid, comprising: a fluid receiving channel for receiving a fluid containing two or more kinds of particles And a second standing wave adding means for adding a second standing wave to the fluid receiving channel, wherein the second standing wave has a frequency corresponding to a multiple of the first standing wave . Furthermore, it may further comprise means for displacing the phase of the first standing wave.본 발명은 유체 내에 섞여 있는 두 종류 이상의 입자를 분리하여 정렬하기 위한 입자 분리 및 정렬 장치에 관한 것으로서, 두 종류 이상의 입자가 포함된 유체를 수용하기 위한 유체 수용 채널, 상기 유체 수용 채널에 제1 정상파를 부가하기 위한 제1 정상파 부가 수단 및 상기 유체 수용 채널에 제2 정상파를 부가하기 위한 제2 정상파 부가 수단을 포함하되, 상기 제2 정상파는 상기 제1 정상파의 배수에 해당하는 주파수를 가지는 것을 특징으로 한다. 더 나아가, 제1 정상파의 위상을 변위시키는 수단을 추가적으로 포함할 수 있다.