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一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法
专利权人:
中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
发明人:
陈爱亮,吴英,蒋小玲,吕珍珍,刘金钏,杨曙明
申请号:
CN201310613501.2
公开号:
CN103667462A
申请日:
2013.11.27
申请国别(地区):
中国
年份:
2014
代理人:
关畅
摘要:
本发明公开了一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法。该方法包括如下步骤:1)富集待测食品中的细菌,将富集物与与DNA结合物共同孵育,获得PCR扩增模板;所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜,但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质;2)配制PCR反应体系,进行数字PCR反应;所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、细菌通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶;3)根据反应产生的荧光信号,计算所述待测液体食品中的菌落总数。本方法无需对食品中细菌进行分离培养,检测时间缩短至2-3小时;同时大大减少了背景DNA和基质的干扰,灵敏度低至1个拷贝;而且该方法无需设置标准曲线,根据结果可直接判读样品中的菌落总数,大大简化了操作步骤。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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