本发明公开了一种重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和大豆毛油脱胶方法,其中,制备磷脂酶C的方法是通过如下步骤完成的:(1)以保藏编号为GIM1.142(ATCC6538)的金黄色葡萄球菌的基因组DNA为模板,克隆得到磷脂酶C基因,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示;(2)将(1)所得的磷脂酶C基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,构建得到重组的表达质粒;(3)将(2)所得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,获得重组大肠杆菌BL21(28a-S.a PLC)。本发明采用重组大肠杆菌所产磷脂酶C作为催化剂,酶来源方便,产量高,发酵工艺简单且成本低;磷脂酶C脱胶与传统酶法脱胶相比,能缩短反应时间,且降低了中性油的损耗,提高精炼率,在油脂工业领域有一定应用前景。