PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a manufacturing method that enables manufacturing a powder containing crystalline trehalose dihydrate with an excellent yield relative to starch in a consistent process with the starch as a raw material.SOLUTION: A manufacturing method of powder containing crystalline trehalose dihydrate, which includes the steps of operating, together with a starch branch cutting enzyme and cyclo-maltodextrin/glucanotransferase, α-glucosyl trehalose-generating enzyme and a trehalose free enzyme on liquefied starch powder, then, obtaining α,α-trehalose-containing sugar liquid by operating glucoamylase, crystallizing crystalline α,α-trehalose dihydrate from the sugar liquid, and gathering, aging and drying this, in which by using natural or a recombination type enzyme or variant enzymes thereof derived from Paenibacillus microbe as the cyclomaltodextrin/glucanotransferase, without undergoing a fractionation process due to a column chromatography, the α,α-trehalose content in the sugar liquid can be made to exceed 86.0% in terms of anhydride is provided.SELECTED DRAWING: None【課題】 トレハロース二含水結晶含有粉末を、澱粉を原料に、一貫した工程で、対澱粉収率良く製造することを可能にする製造方法を提供する。【解決手段】 液化澱粉に、澱粉枝切酵素及びシクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼとともに、α-グリコシルトレハロース生成酵素とトレハロース遊離酵素を作用させ、次いで、グルコアミラーゼを作用させてα,α-トレハロース含有糖液を得、前記糖液からα,α-トレハロース二含水結晶を晶析させ、これを採取、熟成、乾燥する工程を含み、前記シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼとしてパエニバチルス属微生物由来の天然型若しくは組換え型酵素又はそれらの変異体酵素を用いることにより、カラムクロマトグラフィーによる分画工程を経ることなく、前記糖液中のα,α-トレハロース含量を無水物換算で86.0質量%超とすることを特徴とするレハロース二含水結晶含有粉末の製造方法を提供することにより解決する。【選択図】 なし