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一种提高葡萄糖氧化酶抗氧化性的方法
- 专利权人:
- 湖北大学
- 发明人:
- 江正兵,宋慧婷,赵勇
- 申请号：
- CN201510428825.8
- 公开号：
- CN105039362A
- 申请日:
- 2015.07.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 丁齐旭
- 摘要：
- 本发明提出了一种提高葡萄糖氧化酶抗氧化性的方法，其步骤为：计算机模拟分析葡萄糖氧化酶序列，设计葡萄糖氧化酶编码基因的三个突变体为GOD-8，GOD-M523L-M524L和GOD-M524L-M528L；全基因合成该三个基因序列，并通过重叠延伸PCR扩增；合成突变体基因后克隆到pPIC9K载体上，线性化后电转入毕赤酵母GS115菌株中，再经培养表达、检测筛选，得到表达活性较高的菌株，摇瓶发酵120h后，收集发酵上清液。将发酵上清液在0.05mM Tris-HCL(PH8.0)中透析去除盐离子。经Cellulose DE层析柱纯化得到纯酶样品，经过氧化处理3.5h后检测，GOD的残留酶活只有20％，而突变葡萄糖氧化酶GOD-M524L-M528L的残留酶活则达到30％，提高了其抗氧化性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
