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针对三种甘薯病毒的融合基因及其干涉载体
- 专利权人:
- 河南省农业科学院
- 发明人:
- 张振臣,秦艳红,张德胜,张磊,乔奇,田雨婷,郑文明
- 申请号：
- CN201110079993.2
- 公开号：
- CN102206661B
- 申请日:
- 2011.03.31
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 张爱军
- 摘要：
- 本发明涉及一种针对三种甘薯病毒的融合基因及其干涉载体。针对三种甘薯病毒的融合基因序列为SEQ1，命名为SPFLG。其干涉载体构建时，先设计SPFLG-XbaI和SPFLG-SpeI以及SPFLG-KpnI和SPFLG-ClaI两对引物，将SPFLG基因克隆到T载体上，以SPFLG-T为模板，分别以两对引物进行PCR扩增，将获得的目的基因SPFLG分别用XbaI和SpeI及KpnI和ClaI酶切后，以反向重复的方式分别克隆到pBlueNiRIntron载体的内含子两侧；然后利用XbaI和KpnI进行双酶切，回收目的基因的片段，将其克隆到中间载体pROK219上；用EcoRI和HindIII酶切pROKSPFLG，回收包括35S启动子、反向重复片段和NOS终止子的目的片段，克隆到植物表达载体pBIN19上，命名为pBINSPFLG。试验表明，本发明构建的RNA干涉载体对SPFMV、SPLV和SPVG三种病毒有明显的干扰作用，为培育同时抗三种病毒的转基因甘薯奠定了基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
