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拟南芥人工miRNA基因干涉载体快速构建方法
- 专利权人:
- 浙江省农业科学院
- 发明人:
- 王栩鸣,杨勇,余初浪,周洁,严成其,程晔,陈剑平
- 申请号:
- CN201110048020.2
- 公开号:
- CN102268434A
- 申请日:
- 2011.02.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 陈继亮
- 摘要:
- 本发明涉及一种拟南芥人工miRNA基因干涉载体快速构建方法,完成拟南芥沉默载体构建,主要是针对不同基因修改沉默片段,其他部分都是相同的,扩展了目标载体上不变的DNA区间,将沉默相关片段两端的不变区域事先放入转基因目标载体,再将核心沉默片段连入改造后的载体,直接完成载体构建。在首、尾片段选择时,分析了DNA序列,使得首尾片段通过桥接片段相连后可获得一个StuI酶切位点和一个SnaBI酶切位点,转化大肠杆菌后,可大量制备该载体并用StuI和SnaBI酶内切酶对其进行线性化,直接连接采用本专利方法合成的核心沉默片段,完成拟南芥沉默载体的构建。本发明有益的效果:简便易行,操作方便,效益高,能够极大缩短实验时间,降低单个沉默载体的改造成本。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/