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一种针对甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)的RNA干涉载体及在病毒脱除中的应用
- 专利权人:
- 河南省农业科学院植物保护研究所
- 发明人:
- 张振臣,秦艳红,田雨婷,王永江,张德胜,王爽,乔奇
- 申请号:
- CN201510233552.1
- 公开号:
- CN104818292A
- 申请日:
- 2015.05.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 张爱军
- 摘要:
- 本发明涉及针对甘薯褪绿矮化病毒基因RNase3的干涉载体及其在病毒脱除中的应用。甘薯褪绿矮化病毒RNase3基因的干涉载体的构建方法,包括根据甘薯褪绿矮化病毒RNase3基因的核苷酸序列设计两对引物,利用PCR方法将RNase3基因克隆到T载体上,以RNase3-T为模板,分别用设计的两对引物进行PCR扩增,将获得的目的基因RNase3分别用KpnI和XhoI以及SacI和XbaI酶切后,以反向重复的方式分别克隆到pBlue NiRIntron载体的内含子两侧;利用SacI和KpnI双酶切pIntron-RNase3IR载体,回收含RNase3基因反向重复序列的目的片段RNase3IR,将该目的片段克隆到中间载体pROK219上。本发明针对甘薯上严重发生的SPCSV,成功构建了SPCSV的RNAi载体,并将RNA干扰与茎尖组织培养相结合,建立了甘薯脱毒技术新体系,有效提高了脱除SPCSV的效率和脱毒甘薯品种的产量。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/