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烟粉虱中甘薯褪绿矮化病毒的检测方法及其应用
- 专利权人:
- 河南省农业科学院
- 发明人:
- 张振臣,张盼,乔奇,秦艳红,张德胜,田雨婷,王爽,王永江
- 申请号：
- CN201210061149.1
- 公开号：
- CN102586484B
- 申请日:
- 2012.03.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 张爱军
- 摘要：
- 本发明涉及一种烟粉虱中甘薯褪绿矮化病毒的半巢式RT-PCR检测方法，包括设计合成SPCSV病毒的3条引物CSV70P1、CSV70P2、CSV70P3；用解剖针挑取烟粉虱，放入加有预冷RNA提取液的离心管中，提取烟粉虱的总RNA作为PCR模板，进行反转录；以反转录产物作为模板，利用引物CSV70P1和CSV70P2进行半巢式RT-PCR的第一轮扩增，预期扩增片段大小为431bp；利用引物CSV70P1和CSV70P3进行半巢式RT-PCR的第二轮扩增，预期扩增片段大小为170bp；用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。本发明方法能对单头或多头带毒的烟粉虱进行检测，阳性率为100%，能稳定地检测出单头或多头烟粉虱中的SPCSV，检测效率较高；检测出SPCSV时的cRNA最低浓度为5.69×101拷贝/µL，灵敏性较高。该方法能实现对烟粉虱带毒情况的有效监测，对加强烟粉虱的防治和病毒的蔓延扩散具有重要意义。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
