一种高通量检测蛋白相互作用的方法及其应用
- 专利权人:
- 广州美格生物科技有限公司
- 发明人:
- 松阳洲
- 申请号：
- CN201310157873.9
- 公开号：
- CN103361417B
- 申请日:
- 2013.04.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 汤喜友
- 摘要：
- 本发明公开了一种高通量检测活细胞内蛋白相互作用的方法，以逆转录病毒为基础的BiFC系统，分别将“诱饵”蛋白cDNA克隆入含YFPn的逆转录病毒表达载体，而将18000个人类基因 cDNA分别克隆入含YFPc的逆转录病毒表达载体，通过逆转录病毒感染，产生同时稳定表达待筛选基因-YFPc融合蛋白和“诱饵”蛋白-YFPn融合蛋白的细胞，如果“诱饵”蛋白能与目标蛋白相互作用，通过流式细胞仪在FITC波长将观察到发荧光的细胞并能检测信号强弱。本发明用于筛选在刺激或非刺激条件下与目的蛋白相互作用的蛋白网络，可检测较弱或瞬时相互作用，信噪比高，假阳性率低，灵敏度高。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
