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使用蛋白融合展示技术高通量测定物质间相互作用的方法
专利权人:
韩国生命工学研究院
发明人:
李升九,金宥妌,甘钟植,金河成,李大熙,郑兴采
申请号:
CN201580018385.7
公开号:
CN106164344A
申请日:
2015.02.06
申请国别(地区):
中国
年份:
2016
代理人:
杨黎峰`钟锦舜
摘要:
本发明涉及用于测定结合蛋白和靶物质之间相互作用的方法,包括使用相互作用陷阱(IT)细胞测定结合蛋白和靶物质之间相互作用的步骤。IT细胞具有展示在细胞内包涵体表面的结合蛋白,通过表达可形成包含结合蛋白的活性蛋白颗粒的融合蛋白,即不溶性聚集物(包涵体)。其使得结合蛋白的内在相互作用和活性得到表现,不影响展示在细胞中的结合蛋白活性及遗传信息。此外,本发明涉及筛选文库的方法,还包括以单个细胞单位的回收步骤。此外,本发明还涉及细胞和细胞文库,其将靶物质从细胞外导入细胞,同时保留展示在细胞内包涵体表面的结合蛋白活性和遗传信息,还包括含有编码融合蛋白的多核苷酸的结构或者表达结合蛋白展示在活性包涵体上的融合蛋白。通过使用本发明方法能够提供高通量筛选(HTS),其中通过过表达结合蛋白敏感地标记与其相互作用的靶
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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