PROTÉINE K3 DE GAMME HÔTE DE POXVIRUS EN TANT QUE MARQUEUR DE SÉLECTION POSITIF POUR LA GÉNÉRATION DE POXVIRUS RECOMBINÉS, CIBLE THÉRAPEUTIQUE POUR UNE INFECTION PAR POXVIRUS ET AGENT THÉRAPEUTIQUE POUR MALADIES ASSOCIÉES À PKR
HER MAJESTY THE QUEEN IN THE RIGHT OF CANADA as represented by THE MINISTER OF HEALTH
发明人:
CAO, Jingxin
申请号：
CACA2019/050355
公开号：
WO2019/210392A1
申请日:
2019.03.22
申请国别(地区):
CA
年份:
2019
代理人:
摘要：
Described herein is a novel method for generation of recombinant poxviruses using an E3 and K3 double deletion mutant virus as the parental virus for generation of recombinant viruses. Following allowing for crossing over between the parental virus and an insertion cassette including an orthopox K3 peptide and the gene of interest, recombinant viruses are selected by infecting a host cell line permissive for the orthopox K3 peptide but not for the E3 and K3 double mutant parental virus. It is also demonstrated that a specific small molecule inhibitor of NEDD8 activating enzyme, MLN4924, can completely block poxvirus K3 family protein mediated PKR degradation and virus replication.La présente invention concerne un nouveau procédé de génération de poxvirus recombinés à l'aide d'un virus mutant à double délétion E3 et K3 en tant que virus parental pour la génération de virus recombinés. Suite à un croisement (cross-over) entre le virus parental et une cassette d'insertion comprenant un peptide K3 d'orthopox et le gène d'intérêt, des virus recombinés sont sélectionnés par infection d'une lignée de cellules hôtes permissive pour le peptide K3 d'orthopox mais pas pour le virus parental double mutant E3 et K3. Il est également démontré qu'un inhibiteur spécifique à petite molécule de l'enzyme d'activation de NEDD8, MLN4924, peut complètement bloquer la dégradation de PKR médiée par une protéine de la famille K3 des poxvirus et la réplication du virus.
