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一种表达混合酶制剂的毕赤酵母的制备方法及其应用
- 专利权人:
- 上海国龙生物科技有限公司
- 发明人:
- 林莉莉,张慧,朱佑民,于婷婷,郑业鸿
- 申请号:
- CN202110271357.3
- 公开号:
- CN113322270A
- 申请日:
- 2021.03.12
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2021
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明提出了一种表达混合酶制剂的毕赤酵母的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、化学合成改良的2‑10种酶的基因序列;S2、将S1所得序列与毕赤酵母表达载体均酶切后连接或重组,获取多个不同的表达质粒;S3、将S2中构建的表达质粒线性化后混合,转化入毕赤酵母感受态细胞中;S4、通过His缺陷和G418抗性初步筛选出有基因插入的毕赤酵母菌,然后通过PCR方法筛选出含有多个不同基因的阳性克隆菌株,得到能够同时表达多种酶的毕赤酵母。本发明只经过一次构建就可以得到含有多种酶基因的毕赤酵母,而且只需一次发酵在同一菌株中就能表达多种酶,再经一次提纯就可以获得混合的最终酶产物。成本降低,操作简单,省时省力,效率很高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/