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一种利用数字PCR检测食品中大肠菌群数量的方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
- 发明人:
- 陈爱亮,吴英,蒋小玲,吕珍珍,刘金钏,杨曙明
- 申请号：
- CN201310613503.1
- 公开号：
- CN103667463A
- 申请日:
- 2013.11.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 关畅
- 摘要：
- 本发明公开了一种利用数字PCR检测待测食品中大肠菌群数量的方法。该方法包括如下步骤：1）富集待测食品中的细菌，将富集物与DNA结合物共同孵育，获得PCR扩增模板；所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜，但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质；2）配制PCR反应体系，进行数字PCR反应；所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、大肠菌群通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶；3）根据反应产生的荧光信号，计算所述待测食品中的大肠菌群数量。本方法无需对食品中细菌进行分离培养，检测时间短至3-4小时；同时减少了背景DNA和基质的干扰，灵敏度低至1个拷贝；且该方法无需设置标准曲线，根据结果可直接判读样品中的大肠菌群数量，大大简化了操作步骤。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
