KONKUK UNIVERSITY INDUSTRIAL COOPERATION CORP.;건국대학교 산학협력단
发明人:
KIM, JONG BO,김종보,KIM, MI SEON,김미선,YAE, BYEONG WOO,예병우
申请号：
KR1020100120458
公开号：
KR1020120058929A
申请日:
2010.11.30
申请国别(地区):
KR
年份:
2012
代理人:
摘要：
PURPOSE: A method for producing a transgenic Cymbidium plant body is provided to enhance transformation efficiency and to identify acetosyringone addition effect. CONSTITUTION: A method for culturing Cymbidium protocorm-like bodies(PLB) comprises: a step of cutting a new shoot from protocorm in a size of width 0.5cm and length 0.5cm； a step of placing the shoot in a medium and culturing at 24+/-1 degrees Celsius under a light condition for 16 hours； and a step of sub-culturing every four weeks.본 발명은 아그로박테리움을 이용한 심비디움 형질전환에서 심비디움 원괴체에 침지처리, 접종농도, 공동배양 기간 및 아세토시린곤 첨가를 통한 고효율의 형질전환 심비디움 식물체 생산에 관한 것이다.본 발명의 목적은 아그로박테리움을 이용한 형질전환 심비디움 식물체 생산에 효과적으로 적용할 수 있는 방법을 제공하는 것이다. 상세하게는 심비디움 형질전환에 사용되는 원괴체 (PLB) 절편체에 아그로박테리움 접종 시, 효율적으로 아그로박테리움이 식물세포에 접촉하여 감염될 수 있도록 침지처리 그리고 접종농도를 달리하여 최적의 배양액 접종농도를 찾고자 하고, 또한 다양한 공동배양기간 처리와 아세토시린곤 첨가를 통해 최적의 배양기간과 아세토시린곤 첨가효과 구명을 통해 아그로박테리움 심비디움 형질전환에 필요한 최적의 방법을 제공하는데 목적이 있다.상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아그로박테리움을 이용한 심비디움 형질전환에 있어서 침지처리와 다양한 접종농도 처리를 통해 최적의 아그로박테리아배양액이 식물세포에 접촉 및 감염될 수 있는 확율을 높이고자 하고, 감염 후, 식물세포와 아그로박테리움과의 공동배양 시 최적의 배양기간을 찾고 마지막으로 공동배양 기간 동안 아세토시린곤 첨가를 통해 그 효과를 규명하는 단계로 이루어진 것에 특징이 있다.본 발명의 효과는 심비디움 원괴체를 절편체로 하여 아그로박테리움 매개 형질전환 시 효율이 높은 방법을 제공하는 것이다. 더욱 상세하게는 심비디움 원괴체 (PLB) 조직에 최초 아그로박테리움 감염 시 침지처리와 접종농도의 효과를 구명하여 효과적인 감염방법을 제공하고, 이어 식물세포와의 공동배양 과정에서 최적의 배양기간과 아세토시린곤 첨가효과를 구명하여 보다 효율적인 형질전환방법을 제공한다.[색인어]심비디움, 아그로박테리움, 원괴체, 형질전환,
