本发明属于基因工程和酶工程技术领域,具体内容涉及一种热稳定性改良的木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E、V81P/G82E/D185P/S186E及其基因和应,所述木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E为氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的木聚糖酶的第81位缬氨酸突变为脯氨酸且第82位甘氨酸突变为谷氨酸。进一步,将木聚糖酶的第81位缬氨酸突变为脯氨酸且第82位甘氨酸突变为谷氨酸;第185位的天冬氨酸突变为脯氨酸且第186位的丝氨酸突变为谷氨酸,得到木聚糖酶XynAS9-m突变体V81P/G82E/D185P/S186E。本发明的获得的突变酶的热稳定性明显提高,显示出了在纸浆酿造、生物能源等工业上潜在的应用价值。