The present invention relates to an immunotoxin production method and a cancer treatment composition using same, and more specifically, to an immunotoxin production method, an immunotoxin produced thereby and a cancer treatment composition, the immunotoxin production method comprising the site-specific binding of an immunoglobulin variant substituted by cysteine, to PE24 having an unnatural amino acid inserted therein. According to the present invention, by means of a technique for introducing reactive cysteine in a monoclonal antibody using site-directed mutagenesis, and a method for inserting an unnatural amino acid in a protein, biochemical properties, such as antigen binding by an antibody and catalyst activation by a toxin, are not affected, and an allogeneic immunotoxin exhibiting cytotoxicity to a cancer cell line may be produced, and thus the present invention may enable the production of various antibody-protein conjugates and may be applied for a cancer therapeutic agent.La présente invention concerne un procédé de production d'immunotoxine et une composition de traitement du cancer l'utilisant, et plus particulièrement, un procédé de production d'immunotoxine, une immunotoxine produite par celui-ci et une composition de traitement du cancer, le procédé de production d'immunotoxine comprenant la liaison spécifique à un site d'un variant d'immunoglobuline substitué par de la cystéine, l'invention concerne également une PE24 ayant un acide aminé non naturel inséré à l'intérieur de celle-ci. La présente invention utilise une technique d'introduction de cystéine réactive dans un anticorps monoclonal à l'aide d'une mutagénèse dirigée à un site, et un procédé d'insertion d'un acide aminé non naturel dans une protéine, n'affectant pas les propriétés biochimiques, telles qu'une liaison à l'antigène par un anticorps et une activation de catalyseur par une toxine, ce qui permet d'obtenir une immunotoxine allogénique qui présente une cytotoxicité vis-à-vis d'une lign