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一种葡萄糖基转移酶基因及其制备方法和重组工程菌及其构建方法和应用
- 专利权人:
- 德清爵胜生物科技有限公司
- 发明人:
- 陈小龙,王益栋,范永仙,陆跃乐
- 申请号:
- CN201510680846.9
- 公开号:
- CN105385700A
- 申请日:
- 2015.10.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 王从友
- 摘要:
- 本发明公开了一种葡萄糖基转移酶基因工程菌的构建、表达和应用,所述的葡萄糖基转移酶基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1,其基因来源于Xanthomonas campestris pv.campestris。本发明利用一步法克隆试剂盒用于基因的克隆,并将目的基因连接到pET系列载体中,并导入大肠杆菌Rosetta™(DE3) [F− ompT hsdSB(rB− mB− ) gal dcm (DE3) pRARE2 (CamR)]中。对重组大肠杆菌利用乳糖作为诱导剂进行蛋白表达优化,并对葡萄糖基转移酶催化合成α-熊果苷的酶学性质进行研究。采用本发明优化后生产α-熊果苷的产量达21-30g/L,对苯二酚转化率可达90%以上,且反应时间在2-4h之间,利用此大肠杆菌重组工程菌进行α-熊果苷的生产具有良好的工业前景。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/