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一种热诱导的基因编辑系统CRISPR-Cas12b在陆地棉中的应用
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 金双侠,张献龙,王琼琼,王福秋,李波,丁宵
- 申请号:
- CN202010179130.1
- 公开号:
- 申请日:
- 2020.15.03
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种热诱导的基因编辑系统CRISPR‑Cas12b首次在陆地棉中的应用。对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ载体进行改造,以密码子优化合成的AaCas12b蛋白取代原Cas9蛋白,构建棉花中具有编辑能力的载体。选取GhCLA为目标基因验证载体在棉花中的应用。设计2个靶标,利用农杆菌介导的转化将Cas12b编辑系统导入棉花基因组,使用三种温度不同时间处理下胚轴,转基因植株进行相关测序,检测异源四倍体棉花基因组中的编辑效率和全基因组检测脱靶效应。本发明使用特定的温度和处理时间得到良好的编辑效率和特异性。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/