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一种陆地棉基因组的高效定向基因调控的编辑方法
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 王茂军,金双侠,惠凤娇,张献龙,李波
- 申请号：
- CN202110572919.8
- 公开号：
- CN113278647A
- 申请日:
- 2021.05.25
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2021
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种陆地棉基因组的高效定向基因调控的编辑方法，本发明对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的GhBE3‑Dcas9载体进行改造，以6TAL‑2VP64+2linker+dCas9融合蛋白取代原有的APOBEC1‑XTEN‑dCas9‑UGI蛋白，构建在棉花中具有定向上调单个基因表达量的载体Gh‑dCas9‑TV。选取GhEPSP和GhPAP1D为目标基因验证Gh‑dCas9‑TV在棉花中的应用。设计2个单靶标以及一个双靶标，利用农杆菌介导的遗传转化将转录激活编辑系统导入棉花基因组，对转基因植株进行表达量检测和转录组测序，检测本发明在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率及全基因组和全转录组检测靶标基因，非靶标基因表达量效应。本发明具有良好的编辑效率和特异性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
