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基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法及载体
专利权人:
华中农业大学
发明人:
王茂军,金双侠,惠凤娇,张献龙,李波
申请号:
CN202110608540.8
公开号:
CN113174401A
申请日:
2021.06.01
申请国别(地区):
CN
年份:
2021
代理人:
摘要:
本发明涉及基因工程技术领域,且公开了基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法,包括以下步骤:1)菜豆黄矮病毒的复制子元件BeSRL和ULIR目的序列的获得:查阅文献DNA Replicons for Plant Genome Engineering从中获取菜豆黄矮病毒的复制子元件BeSRL和ULIR目的序列,然后经过(GenScript)合成;2)转化载体BeYDV‑Cas9‑KI的构建:利用限制性内切酶Sbf I酶切pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ载体,连接黄矮病毒的复制子元件BeSRL,将pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ进行Sbf I酶切。该基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法及载体,在棉花中首次成功建立了适应于棉花基因组特性的基因敲入编辑系统,该系统能够将外源基因定点插入到棉花基因组中,它将成为棉花功能基因组研究新的重要的技术手段,且在棉花中的敲入效率达1.0%。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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