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利用CRISPR-Cas9构建的斑马鱼cip2a基因突变体及其构建方法
- 专利权人:
- 苏州大学附属儿童医院
- 发明人:
- 吴怡,方芳,李之珩,钱光辉
- 申请号：
- CN201811032925.9
- 公开号：
- CN109082426A
- 申请日:
- 2018.09.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 刘新宇`李茂家
- 摘要：
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用CRISPR‑Cas9构建斑马鱼cip2a基因突变体以及使用该方法构建的斑马鱼cip2a基因突变体。其中包括了cip2a基因座上Cas9‑gRNA靶位点的设计，Cas9mRNA和cip2a‑gRNA的合成，以及体内显微注射和后续遗传筛选。该靶位点的序列位于cip2a基因第二个外显子上；同时设计一对包含靶位点的引物，通过PCR进行靶位点突变的验证。该验证方式同样适用于后续遗传筛选。本发明所述的利用CRISPR‑Cas9技术构建的cip2a斑马鱼突变体表现出高突变率，且突变造成了Cip2a蛋白翻译的提前终止。此外，本发明所述的cip2a基因突变斑马鱼仅通过连续的两代筛选就得到了。本发明获得了2种突变类型的cip2a突变体斑马鱼系。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
