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T-DNA及其插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法
- 专利权人:
- 河南省农业科学院园艺研究所
- 发明人:
- 梁慎,徐小利,赵卫星,常高正,李晓慧,程丹丹
- 申请号：
- CN201410336970.9
- 公开号：
- CN104152442A
- 申请日:
- 2014.07.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 樊羿
- 摘要：
- 本发明涉及一种T-DNA及其真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法。本发明T-DNA包括左臂、右臂DNA，以及二者之间的多克隆位点和eGFP基因，且该T-DNA具有SEQIDNO.9所示的核苷酸序列，本发明公开了其载体及构建方法；该T-DNA的真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的巢式PCR扩增的上游引物对应于eGFP基因的左端序列，下游引物对应于右臂的左端序列；该右臂侧翼基因组序列的鉴定方法包括基因组DNA提取、酶切处理、纯化处理、连接反应、巢式PCR扩增及其产物鉴定、克隆和测序等步骤。本发明引物特异性强，能够快速、准确、高效、稳定、普适性地扩增出T-DNA的右臂侧翼基因组DNA序列，大大提高鉴定效率。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
