基因mRNA的m⁶A单碱基位点鉴定方法

• 收藏
• 分享

专利权人:

浙江大学

发明人:

汪以真,王新霞,蔡旻,江芹

申请号：

CN201610799660.X

公开号：

CN106399488A

申请日:

2016.08.31

申请国别(地区):

中国

年份:

2017

代理人:

金祺

摘要：

本发明公开了一种基因mRNA的m⁶A单碱基位点鉴定方法，包括以下步骤：1)、将样品进行高通量测序，根据测序结果挑选出靶基因，并确定其m⁶A峰大致位置；2)、利用在线工具SRAMP得到该基因的m⁶A峰区域序列中所有可能存在m⁶A位点信息；3)、构建该基因的超表达载体和突变载体；4)、将步骤3)得到的两种载体分别转染细胞，收集细胞提取RNA；5)、将步骤4)得到的富集的含有m⁶A的RNA反转录为cDNA，设计各个突变位点区域的荧光定量引物；将超表达载体组和突变载体组的荧光定量结果比较，若某位点突变载体组结果小于超表达载体组且P<0.05，则判定该位点是m⁶A位点。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/