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绵羊Noggin基因的克隆和慢病毒表达载体的构建
- 专利权人:
- 新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心
- 发明人:
- 刘明军,贺三刚,李文蓉,张雪梅,张宁
- 申请号：
- CN201010580022.1
- 公开号：
- CN102181447A
- 申请日:
- 2010.12.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 欧咏
- 摘要：
- 本发明的绵羊Noggin基因的克隆和慢病毒表达载体的构建，确定绵羊Noggin基因编码区的全序列；设计克隆Noggin基因全长cDNA的PCR引物，上游引物N1：ATAGGATCCGGAGGCATGGAGCGCTGCCCCAG，下游引物N2：CGACTCGAGCTAGCACGAGCACTTGCACTC；其引物酶切位点外侧含有保护碱基ATA和CGA；将目的基因克隆于pET41a原核表达载体中，获得pET41a-Noggin重组载体；设计将目的基因定向克隆与慢病毒表达载体的引物：上游引物P1：ATAGGATCCGGAGGCATGGAGCGCTGCCCCAG，下游引物P2：CGACTCGAGCTAAGCGTAGTCTGGGACGTCGTATGGGTAGCACGAGCACTTGCACTC(包含HA抗体标签)；将目的基因定向克隆于pLEX慢病毒载体中，获得Noggin基因慢病毒载体，生产重组病毒，生产转Noggin基因绵羊；通过PCR方法鉴定其转基因羊。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
