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慢病毒表达载体及其制备方法和应用、重组慢病毒的制备方法
- 专利权人:
- 深圳精准医疗科技有限公司
- 发明人:
- 杨世成,毛侃琅
- 申请号:
- CN201510963004.4
- 公开号:
- CN105483158A
- 申请日:
- 2015.12.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 生启
- 摘要:
- 本发明公开了一种及其制备方法和应用、重组慢病毒的制备方法,所述慢病毒表达载体为pRRLSIN.cPPT.MSCV-Dual.WPRE载体,pRRLSIN.cPPT.MSCV-Dual.WPRE载体为pRRLSIN.cPPT.MSCV/GFP.WPRE载体的GFP序列被替换为双基因表达盒子Dual得到;双基因表达盒子Dual包括从5’到3’端依次排列的如下结构:第一多克隆位点-弗林蛋白酶切割位点-V5标签-Spacer-2A肽-第二多克隆位点,其中,“-”代表连接。这种慢病毒表达载体利用2A肽实现双外源基因在哺乳动物细胞内的表达,2A肽具有“自我剪切”的特性,在蛋白质的翻译过程中,2A肽改变了核糖体的活性,促进2A肽残基Gly与tRNAGly之间酯链的水解,从转录复合物上释放上游多肽的同时又起始下游多肽的翻译,在翻译水平上实现的双基因表达。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/