PROBLEM TO BE SOLVED: To provide insulin analogues exhibiting resistance to protease, a method for the preparation of the insulin analogues, insulin preparations containing the insulin analogues, and a method of treating diabetes mellitus using these insulin analogues.SOLUTION: In the insulin analogue of the present invention, at least two hydrophobic amino acids of a parent insulin have been substituted with hydrophilic amino acids, and the substitutions are within or in close proximity to two or more protease cleavage sites of the parent insulin. The insulin analogue may further comprise one or more additional mutations.【課題】プロテアーゼに対する耐性を示すインスリンアナログ、該インスリンアナログの調製方法、該インスリンアナログを含有するインスリン製剤及びこれらのインスリンアナログを使用する真性糖尿病の治療方法を提供する。【解決手段】親インスリンに対し、少なくとも２の疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換されており、該置換が、親インスリンの２以上のプロテアーゼ切断部位の内部又はこれに近接して存在しているインスリンアナログであって、一又は複数の付加的な変異をさらに含んでいてもよい、インスリンアナログ。【選択図】なし
