HELMHOLTZ ZENTRUM MÜNCHEN - DEUTSCHES FORSCHUNGSZENTRUM FÜR GESUNDHEIT UND UMWELT (GMBH)
发明人:
KÜHN, Ralf,WURST, Wolfgang,MEYER, Melanie
申请号：
EPEP2013/056252
公开号：
WO2013/139994A1
申请日:
2013.03.25
申请国别(地区):
WO
年份:
2013
代理人:
摘要：
The present invention relates to a method of producing an oocyte carrying a modified target sequence in its genome, the method comprising the steps: (a) introducing into an oocyte a nuclease that specifically binds to and introduces a double-strand break in said target sequence or a nucleic acid molecule encoding said nuclease and (b) introducing a single stranded oligodesoxynucleotide into the oocyte, wherein the oligodesoxynucleotide comprises a donor nucleic acid sequence and regions homologous to the target sequence thereby inducing homologous recombination at the target sequence with the donor nucleic acid sequence. The present invention further relates to a method of producing a non-human vertebrate carrying a modified target sequence in its genome, the method comprising: (a) producing an oocyte carrying a modified target sequence in its genome in accordance with the method of the invention (b) transferring the oocyte obtained in (a) to a pseudopregnant female host and (c) analysing the offspring delivered by the female host for the presence of the modification.La présente invention concerne une méthode de production dun ovocyte portant une séquence cible modifiée au sein de son génome, la méthode comprenant les étapes consistant à : (a) introduire une nucléase à lintérieur dun ovocyte, la nucléase se liant de manière spécifique à la séquence cible et introduisant une cassure bicaténaire dans ladite séquence cible, ou une molécule dacide nucléique codant pour ladite nucléase et (b) introduire un oligodésoxynucléotide monocaténaire à lintérieur de lovocyte, loligodésoxynucléotide comprenant une séquence dacide nucléique donneur et des régions homologues à la séquence cible induisant ainsi une recombinaison homologue à la séquence cible avec la séquence dacide nucléique donneur. La présente invention concerne en outre une méthode de production dun vertébré non humain portant une séquence cible modifiée au sein de son génome, la méthode comprenant les étapes co
