Methods and compositions are provided for producing at least one targeted genetic modification in a target genomic locus in a cell and producing a non-human animal comprising a modified genomic locus. The method uses two or more large targeting vectors that are capable of recombining with each other and the target genomic locus with a single genome targeting step. The method can also be used in combination with a nuclease agonist. Also provided are methods and compositions for enhancing homologous recombination at the target genomic locus of a cell. The method uses two or more nucleic acids containing one or more redundant sequences. The method can be used in combination with a nuclease agonist or without a nuclease agonist.세포 내의 표적 게놈 유전자좌에 하나 이상의 표적화된 유전자 변형을 생성시키고, 변형된 게놈 유전자좌를 포함하는 비인간 동물을 생산하는 방법 및 조성물이 제공된다. 방법은, 단일 게놈 표적화 단계로 서로 그리고 표적 게놈 유전자좌와 재조합가능한 2개 이상의 큰 표적화 벡터를 사용한다. 방법은 또한 뉴클레아제 작용제와 조합하여 사용될 수 있다. 또한, 세포의 표적 게놈 유전자좌에서 상동 재조합을 향상시키는 방법 및 조성물이 제공된다. 방법은 하나 이상의 중복 서열을 포함하는 2개 이상의 핵산을 사용한다. 방법은 뉴클레아제 작용제와 조합하여 또는 뉴클레아제 작용제 없이 사용될 수 있다.
